1986
История нашей группы начинается
с января 1986 года, когда В.П.Булгаков "забрел" в Биолого-почвенный
институт ДВНЦ РАН. Здесь он познакомился с Ю.Н.Журавлевым и
был принят на должность старшего инженера для работы с новым направлением
- биотехнологией клеток растений. С тех пор произошло много событий,
и много еще произойдет ...
В начале в группе была получена культура каллусов кирказона маньчжурского,
в течение года были проведены опыты по изучению сезонной динамики
калллусогенеза, влиянию экспланта и гормонов на образование и рост
каллусов. Осенью 1986 года в группу пришли Эля Бабкина и Светлана
Радченко.
1987 Шли полным ходом
эксперименты по изучению влияния компонентов питания на рост каллусов
и синтез аристолохиевых кислот. Сделаны первые выделения протопластов,
попытки суспензионного выращивания, проведены вместе с ТИБОХ первые
исследования фармакологического действия и токсичности экстрактов
лианы и каллусов. В июле было оформлено первое авторское свидетельство
"Cпособ получения аристолохиевых кислот", вскоре мы депонировали культуру
каллусов во Всесоюзную коллекцию клеток высших растений при Институте
физиологии АН СССР - штамм А1 кирказона (ВСКК-ВР 33) и в редакцию
"Растительных ресурсов" поступила первая статья нашей группы "Получение
каллусных культур ткани Aristolochia manshuriensis Kom". Летом
В.П.Булгаков из Москвы привез дикие штаммы агробактерий и первые
растения, из которых мы получили трансформированные корни, был картофель
сорта Адретта. К концу года в группе появились Марина Силачева,
Владимир Лаптев и Ирина Ожигова.
1988 Трансформации
подверглись картофель, виноград, дурман индейский, воробейник, кирказон.
Вскоре была получена трансгенная линия кирказона ("Штамм А2", "кремовая"
линия) обладающая высоким индексом роста (за 6,5 недель = 170). Была
проведена селекционная работа по получению штамма ВК-39 воробейника
краснокоричневого. Осенью были получены первые каллусные линии женьшеня
и в группу пришли Марина Козыренко, Елена Альшевская
и Мария Ходаковская.
1989 В начале года
все линии женьшеня получили свою нынешнюю нумерацию, штаммы женьшеня
и кирказона готовились к депонированию. Проводились многофакторные
опыты со штаммами кирказона, изучалось влияние разнообразных гормонов
на рост каллусов женьшеня. К лету в группу пришла Ирина Рысева.
1990 В январе В.П.Булгаков
защитил кандидатскую диссертацию. Осенью-зимой были получены первые
пробные партии настойки кирказона на Омутнинском химическом заводе,
проводилась селекция каллусов воробейника и женьшеня на устойчивость
к цефазолину, начата селекця на средах с фтор-фенилаланином.
1991 В начале года
проводились опыты по оптимизации сред для каллусов женьшеня, продолжалось
получение селекционных фтор-фенилаланин и цефазолин-устойчивых линий
воробейника и женьшеня. Федорееву С.А. (ТИБОХ) были переданы
штаммы каллусных культур для проверки их рибонуклеазной активности.
Высокая рибонуклеазная активность найдена в штамме клеток Cnidium
monnieri и R-1. В августе совместно с ОДСП организовали Всесоюзную
конференцию по биотехнологии растений на теплоходе "М.Шолохов". В
ноябре А.Спена прислал плазмиды с генами rol.
1992 Один из самых
трудных периодов для науки и производства: сокращения, урезания, увольнения.
В январе-феврале идет освоение методик: трансформация E.coli,
трехродительское скрещивание, блоттинг, рестрикция и препаративное
выделение фрагментов. В марте получены плазмиды Ma от J.Ma, начата
трансформация каллусов 1с генами rol. В августе Boronat
прислал pBL12.
1993 Получены трансгенные
культуры женьшеня, завершена работа по цефазолин-устойчивым культурам
женьшеня и воробейника. Начали внедрение масла шиконинового в больницы
города. В группу пришла Г.К.Чернодед. В течение года проводилась
работа по изучению содержания гинзенозидов и фитогормонов в rolC-корнях.
1994 М.В.Ходаковская
получила rolB культуру женьшеня. Составлен первый проект ТУ
на "Масло шикониновое" для ветеринарии. Были проведены основные работы
по изучению синтеза гинзенозидов и содержания фитогормонов в культурах
трансгенных корней женьшеня. Г.К.Чернодед получила культуры
rolC и rolB корней кирказона.
1995 В начале года
в группу пришла Е.Яснецкая, ей были поручены рибонуклеазы женьшеня.
Проведены опыты по биосинтетическим предшественникам гинзенозидов.
Получены и депонированы в Российскую коллекцию клеток высших растений
каллусы марены сердцелистной.
1996 Вышла первая статья
в зарубежной печати - в Италии, по культуре кирказона. Получены побеги
из rolC культуры женьшеня. Начата работа с Н.Ф.Тимченко
по взаимодействию клеток женьшеня с патогенными бактериями.
1997 В январе В.П.Булгаков
защитил докторскую диссертацию в Москве при РХТУ. В группу пришла
Ирина Новикова.
1998 Начаты работы
по тису и маакии, получены первые результаты по трансформации маакии,
по фенольным веществам каллусов тиса. Завершены работы по хромосомным
числам в трансгенном женьшене, по изучению содержания антрахинонов
в каллусах марены сердцелистной.
1999 В декабре в лабораторию
пришли студенты 2-го курса: Юрий Шкрыль и Юлия Таракановская.
Юра занялся определением содержания аристолохиевых кислот в rolC
и rolB культурах Кирказона, а Юля начала освоение методов выделения
ДНК из растений.
2000 В декабре в лабораторию
пришли студенты 4-го курса: Анна Суховей и Константин Киселев.
Аня и Костя занялись изучением влияния экспрессии универсального активатора
транскрипции Gal4 на культуры растений и морских беспозвоночных.
2001 Вышел в свет первый
вариант электронной страницы группы.
2002 В январе в группу
пришла Папина Марина. Весной - Галина Дмитриевна Черкавская.
Летом наша группа официально оформилась и получила название группы
биоинженерии.Также летом 2002 года по инициативе Булгакова В.П.
прошла 1-ая школа биотехнологов БПИ ДВО РАН на м.б.с. "Восток".
Осенью в группу пришла студентка 3-го курса Инюшкина Юля и
студент 1-го курса Шиловский Всеволод.
2003 Летом прошла вторая
школа биотехнологов БПИ ДВО РАН на м.б.с. "Восток".
Осенью успешно освоен метод доказательства экспрессии
генов при помощи обратно-транскрипционной реакции (ОТ ПЦР). В лабораторию
пришли студенты 1-го курса Дубровина Александра и Денис
Безвербный. Александра занялась получением трансгенных клеточных
культур женьшеня и винограда. Денис занялся изучением процессов дифференциации
в культуре клеток - эмбриогенез в культуре клеток.
2004 10
июня в сотрудничестве с Андреем Гончаровым сиквенирован участок гена
агробактерий rolB, гомология участка составила почти 100% с
ранее известной, что говорит о высокой точности поставленного в институте
метода. Начинается постепенное освоение ранее недоступных методов.
15 июня Киселев К.В. защитил кандидатскую диссертацию
в биотехнологическом совете БПИ ДВО РАН. Осенью в группу пришла Ольга
Грищенко. Оля занялась вторичными метаболитами культур Тиса, Маакии
и винограда.
2005
На базе сиквенированого гена актина у женьшеня проводятся
первые попытки количественного ОТ ПЦР - сравнение уровня экспрессии
генов rol в разных культурах женьшеня.
Настает "время плант" - самый урожайный год группы - к печати
принимаются 2 статьи в Planta и 1 статья в Planta Medica!
Дубровиной Александрой получена культура винограда амурского - суперпродуцент
резвератрола - ценного противоопухолевого стильбена, содержание резвератрола
в ней достигает 2,5% от сухой биомассы! Эта работа Александры проходит
как основное достижение РАН.
Сотрудниками группы на культурах женьшеня и рубии показано, что гены
rol способны увеличивать устойчивость клеток в культуре к солевому
и температурному стрессу.